化学原料--广州美基生物科技有限公司

Diethyl pyrocarbonate, DEPC

焦碳酸二乙酯(DEPC),99%

货号 名称 规格 价格(元)
C191 焦碳酸二乙酯(DEPC) 100ml 750
C192 焦碳酸二乙酯(DEPC) 1000ml/瓶 (工业包装) 3500
C193(原货号DTW-500) DEPC处理水 500ml 300
   
产品简介 实验流程
该产品是经过美基严格筛选和质控的核酸提取核心原料。焦碳酸二乙酯是一种有效的核酸酶抑制剂,它能够与很多酶的-NH,-SH或-OH等基团发生反应,从而破坏酶的活性中心。实验表明,0.1%的DEPC可以彻底灭活浓度为0.5ug/ml RNase,更高含量的试剂可以添加至1% DEPC。提高DEPC浓度可以抑制更严重的RNase A污染, 不过溶液中DEPC残留或DEPC副产物的高水平残留会抑制很多酶促反应或化学修饰RNA。已有文献记载了RNA样品中残留的DEPC副产物会抑制体外翻译反应的情况。
进行DEPC处理水制备时,DEPC的用量不要超过0.1%,以防止抑制下游应用。大多数来源于周围环境或实验操作(例如使用了大量RNase的核糖核酸酶保护实验及质粒制备等)的RNase污染来说,0.1%DEPC处理足够。单独进行高压灭菌也可以使RNase A失活,对于品质良好的离心管和枪头等一次性用品,单独进行高压灭菌对于大部分应用来说已经足够。由于高压灭菌只能使部分RNase失活,若下游检测敏感或污染来源不明,建议将一次性离心管或枪头完全浸泡于超纯水中,然后添加0.1% DEPC处理过夜再灭菌。
DEPC在水中的半衰期大约为30分钟。高压灭菌会使DEPC水解并释放出反应副产物CO2和乙醇,并产生轻微的乙醇气味或甜水果味,这是由副产物乙醇与微量的羧酸残留结合形成挥发性酯类而造成的。对于DEPC浓度为0.1%的溶液进行15~20分钟的高压灭菌后即可认为不含DEPC。


 
 
提取流程
在不含Tris/MOPS/HEPES的试剂体系中,加入0.1% DEPC(本产品)然后于磁力搅拌器上搅拌过夜,最后进行15~20分钟的高压灭菌。高压灭菌后会残留轻微的乙醇气味或一种甜水果味,这是由副产物乙醇与微量的羧酸残留结合并形成挥发性酯类而造成的,这种气味是正常现象。灭菌后的产物最好低温保存以防止微生物生长。

 
产品特性与优点
  • 无不可溶物
  • 核酸提取试剂盒专项质控
  • 高纯度>99%
  • 经本产品得到的DEPC处理水(气味更少)
  • 稳定性强
 
产品参数
CAS号 1609-47-8
分子式 C6H10O5
分子量 162.14
纯别 >99%
级别 分子生物学级
性状 无色透明液体
PCR抑制 不抑制(DEPC处理水)
RNase去除效果 通过(0.5ug/ml RNase A溶液中添加0.1%DEPC处理1小时 )
碳酸二乙酯 <1.0%
砷盐 ≤0.0002%
乙醇 ≤0.2%
灼烧残渣 <0.1%
PCR抑制物 未检出(DEPC处理水用于定量PCR)
 
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说明书
 
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