无内毒素质粒提取系列--广州美基生物科技有限公司

无内毒素质粒大提试剂盒

100~250ml菌液,高达100~1500µg低内毒素的质粒DNA

货号 名称 规格 价格(元)
P1156-02 HiPure Plasmid EF Maxi Kit 10次 750
P1156-03 HiPure Plasmid EF Maxi Kit 50次 3500
P1156-02B HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增强版) 10次 735
P1156-03B HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增强版) 50次 3500
   
产品简介 实验流程


本产品适合于从100~250ml细菌培养液中提取100~1500µg低内毒素的质粒DNA。产品采用独特的溶液体系,可处理各种质粒载体,包括常规高低中拷贝数的载体、大型载体,如BAC,Cosmid,P1等。DNA产量取决于载体拷贝数和菌液量。纯化的质粒内毒素含量低于0.1EU/µg,可直接用于细胞转染,动物注射等。

P1156&P1156B与竞品相似,都是醇类介导的纯化方式。菌体经碱裂解酸中和后制备出上清液,可选的Triton X114双水相萃取步骤可进一步去除内毒素,然后加入异丙醇或乙醇调节结合条件过柱进行纯化,得到的质粒可以满足大部分的细胞转染。本产品操作简单和纯度高,但醇类介导特殊性不强,得到质粒DNA常受到RNA污染,造成OD浓度与电泳亮度不相符合,OD浓度虚高,特别是中低拷贝载体优为明显,得到的质粒再用异丙醇沉淀可去除RNA污染,让OD浓度更为真实。

P1156B是在P1156基础上优化的,是增强版,对Triton X114双水相萃取内毒素步骤进化优化,无需水浴和温育就可以萃取内毒素分子,缩了操作时间。P1156B还增加中和内毒素分子的清洗液,得到的质粒DNA内毒素水平更低,RNA污染水平也有明显改进。

P1158不采用醇类介导过柱,而是高盐介导过柱。高盐介导特异性强,得到的质粒DNA不存在RNA污染,OD浓度和电泳亮度相符,质粒OD浓度真实不虚高,转染时质粒定量准确,更有利于结果分析。处理质粒载体多样、转染定量准确、以及内毒素水平低的项目推荐使用该产品。受产品中胍盐污染,当质粒总量低于200ug时,A260/230较低(1.0~1.5),但不影响下游转染等应用。

 
 
提取流程

试剂盒采用玻纤滤膜纯化术,只需进行简单的结合-洗-洗脱的步骤。细菌经离心收集后,首先用碱裂法进行裂解中和,并通过离心去除蛋白质和基因组;上清液再经过带滤膜的注射器去除杂质和内毒素,然后将澄清的裂解物加到纯化柱中进行离心或抽滤,质粒DNA吸附在玻纤膜杂质经过两次清洗去除最后用少量洗脱液或水洗脱出纯化的DNA

 
产品特性与优点
  • 高纯度 - 纯化的质粒可直接于测序,酶切,PCR等运用
  • 快速 - 快速硅胶柱纯化方式,远远快于离子交换
  • 高产量 - 一个柱子可结合高达1.5mg质粒
  • 超低内毒素 -质粒内毒素含量低于0.1EU/µg,可直接用于细胞转染,动物注射等
 
产品参数
主要功能 从100~250ml细菌培养液中提取100~1500µg低内毒素的质粒DNA
纯化产物 质粒DNA
下游应用 细胞转染,动物注射等
纯化方式 大柱高速离心型
纯化技术 玻纤滤膜纯化柱
操作方法 离心操作
样品类型 常规高低中拷贝数的载体、大型载体
样品用量 高拷贝数载体:100-150ml培养液;低拷贝数载体:150-250ml培养液
核酸产量 100~1500µg
最少洗脱体积 0.7ml
操作时间 不超过60分钟
柱子每次载液体积 20ml
柱子最大核酸载量 1mg
 
下载资源
说明书
性能验证报告
异丙醇沉淀质粒去除RNA污染的方法
 
更多详细信息
产品样式
  • 公司名称:广州美基生物科技有限公司
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    订货电话1:020-89857862
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    大工业客户:13430287051(朱先生)
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