100~250ml菌液,高达100~1500µg低内毒素的质粒DNA
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
P1156-02 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 10次 | 750 |
P1156-03 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 50次 | 3500 |
P1156-02B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增强版) | 10次 | 735 |
P1156-03B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增强版) | 50次 | 3500 |
产品简介 | 实验流程 |
本产品适合于从100~250ml细菌培养液中提取100~1500µg低内毒素的质粒DNA。产品采用独特的溶液体系,可处理各种质粒载体,包括常规高低中拷贝数的载体、大型载体,如BAC,Cosmid,P1等。DNA产量取决于载体拷贝数和菌液量。纯化的质粒内毒素含量低于0.1EU/µg,可直接用于细胞转染,动物注射等。
P1156&P1156B与竞品相似,都是醇类介导的纯化方式。菌体经碱裂解酸中和后制备出上清液,可选的Triton X114双水相萃取步骤可进一步去除内毒素,然后加入异丙醇或乙醇调节结合条件过柱进行纯化,得到的质粒可以满足大部分的细胞转染。本产品操作简单和纯度高,但醇类介导特殊性不强,得到质粒DNA常受到RNA污染,造成OD浓度与电泳亮度不相符合,OD浓度虚高,特别是中低拷贝载体优为明显,得到的质粒再用异丙醇沉淀可去除RNA污染,让OD浓度更为真实。 |
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提取流程 | |
本试剂盒采用玻纤滤膜纯化技术,只需进行简单的结合-洗涤-洗脱的步骤。细菌经离心收集后,首先用碱裂法进行裂解中和,并通过离心去除蛋白质和基因组;上清液再经过带滤膜的注射器去除杂质和内毒素,然后将澄清的裂解物加到纯化柱中进行离心或抽滤,质粒DNA吸附在玻纤膜上;杂质经过两次清洗被去除,最后用少量洗脱液或水洗脱出纯化的DNA。 |
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产品特性与优点 | |
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产品参数 | |
主要功能 | 从100~250ml细菌培养液中提取100~1500µg低内毒素的质粒DNA |
纯化产物 | 质粒DNA |
下游应用 | 细胞转染,动物注射等 |
纯化方式 | 大柱高速离心型 |
纯化技术 | 玻纤滤膜纯化柱 |
操作方法 | 离心操作 |
样品类型 | 常规高低中拷贝数的载体、大型载体 |
样品用量 | 高拷贝数载体:100-150ml培养液;低拷贝数载体:150-250ml培养液 |
核酸产量 | 100~1500µg |
最少洗脱体积 | 0.7ml |
操作时间 | 不超过60分钟 |
柱子每次载液体积 | 20ml |
柱子最大核酸载量 | 1mg |
下载资源 |
说明书 |
性能验证报告 |
异丙醇沉淀质粒去除RNA污染的方法 |